NAD+ vs 5-amino-1MQ: δύο δρόμοι στη μελέτη του κυτταρικού μεταβολισμού

Σύντομη απάντηση: Στη σύγκριση NAD+ vs 5-amino-1MQ, οι δύο ενώσεις βρίσκονται σε αντίθετες άκρες του ίδιου μεταβολικού δρόμου. Το NAD+ (νικοτιναμιδο-αδενινο-δινουκλεοτίδιο) είναι το ίδιο το συνένζυμο, που υπάρχει σε κάθε ζωντανό κύτταρο. Το 5-amino-1MQ είναι μικρό συνθετικό μόριο που αναστέλλει το ένζυμο NNMT, το οποίο καταναλώνει μια πρόδρομη ουσία του NAD+. Συναντιούνται σε ένα σημείο, το νικοτιναμίδιο, και γι' αυτό συζητιούνται μαζί.

Οι δύο ενώσεις εμφανίζονται συχνά στην ίδια λίστα παραγγελιών ενός εργαστηρίου. Δεν είναι όμως εναλλακτικές μεταξύ τους. Παρακάτω θα δείτε τι είναι η καθεμία, τι έχει μελετηθεί και ποιες διαφορές θα συναντήσετε στον πάγκο.

Τι είναι το NAD+;

Το NAD+ είναι η οξειδωμένη μορφή του νικοτιναμιδο-αδενινο-δινουκλεοτιδίου, ενός συνενζύμου που υπάρχει σε όλα τα ζωντανά κύτταρα. Έχει δύο ρόλους:

• Μεταφέρει ηλεκτρόνια σε οξειδοαναγωγικές αντιδράσεις της γλυκόλυσης, του κύκλου του κιτρικού οξέος και της οξειδωτικής φωσφορυλίωσης.
• Καταναλώνεται ως υπόστρωμα από οικογένειες ενζύμων όπως οι σιρτουίνες, οι PARP και το CD38.

Επειδή είναι ταυτόχρονα φορέας ηλεκτρονίων και υπόστρωμα που «ξοδεύεται», τα επίπεδα NAD+ στο κύτταρο είναι συνηθισμένος δείκτης στην έρευνα του μεταβολισμού και της γήρανσης. Το NAD+ έχει τεράστια βιβλιογραφία, δεκαετίες βιοχημείας και πολλές πρόσφατες μελέτες σε ζωικά μοντέλα.

Τι είναι το 5-amino-1MQ;

Το 5-amino-1MQ (5-αμινο-1-μεθυλοκινολίνιο) είναι μικρό συνθετικό μόριο της ομάδας των κινολινίων. Αναπτύχθηκε ως εκλεκτικός αναστολέας της N-μεθυλοτρανσφεράσης του νικοτιναμιδίου, του ενζύμου NNMT.

Το NNMT μεθυλιώνει το νικοτιναμίδιο σε 1-μεθυλονικοτιναμίδιο, χρησιμοποιώντας ως δότη μεθυλίου την S-αδενοσυλο-μεθειονίνη. Το νικοτιναμίδιο όμως είναι και πρόδρομη ουσία για την ανακύκλωση του NAD+. Η υπόθεση εργασίας πίσω από τους αναστολείς του NNMT είναι ότι, αν μπλοκαριστεί η μεθυλίωση, μένει περισσότερο νικοτιναμίδιο διαθέσιμο για τη σύνθεση NAD+ μέσα στο κύτταρο. Η βιβλιογραφία του 5-amino-1MQ είναι πολύ μικρότερη και νεότερη, από το 2017 περίπου και μετά.

NAD+ vs 5-amino-1MQ: πού διαφέρουν;

Ένας χρήσιμος τρόπος να το θυμάστε: η βιβλιογραφία του NAD+ αφορά κυρίως την παροχή ή αποκατάσταση ενός συμπαράγοντα, ενώ η βιβλιογραφία του 5-amino-1MQ αφορά την αναστολή ενός ενζύμου και τη μέτρηση του τι συμβαίνει στο απόθεμα του συμπαράγοντα πιο κάτω.

Τι έχει μελετηθεί για την καθεμία;

NAD+ και πρόδρομες ουσίες

• Μεταβολές της διαθεσιμότητας NAD+ με την ηλικία σε διάφορα όργανα τρωκτικών.
• Μιτοχονδριακός οξειδωτικός μεταβολισμός και γονιδιακή έκφραση σε σκελετικούς μύες και ήπαρ ηλικιωμένων ποντικών.
• Δραστηριότητα σιρτουινών και PARP, που χρησιμοποιούν το NAD+ ως υπόστρωμα.
• Ενεργειακός μεταβολισμός σε τρωκτικά που έλαβαν πρόδρομες ουσίες του NAD+, όπως το NMN.
• Μοντέλα νευροεκφύλισης σε ποντικούς.

5-amino-1MQ και αναστολή του NNMT

• Εκλεκτικότητα έναντι συγγενών μεθυλοτρανσφερασών και ενζύμων ανακύκλωσης του NAD.
• Διαπερατότητα μεμβρανών σε δοκιμασίες τεχνητής μεμβράνης και κυττάρων Caco-2.
• Μετρήσεις ενδοκυττάριων μεταβολιτών σε καλλιεργημένα λιποκύτταρα, όπως 1-μεθυλονικοτιναμίδιο, NAD και S-αδενοσυλο-μεθειονίνη.
• Λιπογένεση σε σειρές λιποκυττάρων και μετρήσεις σύστασης σώματος σε ποντίκια με παχυσαρκία από δίαιτα.

Όλα αυτά είναι ευρήματα σε κύτταρα ή σε ζώα. Δεν αποτελούν απόδειξη για κανένα αποτέλεσμα στον άνθρωπο.

Ποιες μορφές υπάρχουν και πώς αποθηκεύονται;

NAD+

Το NAD+ διατίθεται ως λυοφιλοποιημένη σκόνη σε γυάλινο φιαλίδιο με στείρο πώμα και φυλάσσεται στους 2 έως 8 °C, μακριά από το φως. Η σκόνη είναι υγροσκοπική, οπότε μένει σφραγισμένη μέχρι τη χρήση. Τα υδατικά διαλύματα του NAD+ είναι λιγότερο σταθερά από την ξηρή μορφή και ετοιμάζονται συνήθως λίγο πριν από τη μέτρηση.

5-amino-1MQ σε φιαλίδιο

Το 5-amino-1MQ 50 mg είναι λυοφιλοποιημένη σκόνη σε γυάλινο φιαλίδιο, για αποθήκευση σε δροσερό και ξηρό μέρος (2 έως 8 °C), μακριά από το φως. Μετά τη διάλυση επιτρέπει ακριβείς μεταφορές όγκου, χρήσιμες σε αναλύσεις και σειρές αραιώσεων.

5-amino-1MQ σε κάψουλες

Οι κάψουλες 5-amino-1MQ περιέχουν 50 mg η καθεμία, 30 κάψουλες σε σφραγισμένη φιάλη HDPE, για αποθήκευση στους 15 έως 25 °C, μακριά από την υγρασία. Κάθε μονάδα είναι προμετρημένη και το υλικό μένει ξηρό μέχρι τη στιγμή που θα ετοιμάσετε διάλυμα. Το περίβλημα της κάψουλας δεν είναι μέρος του πειράματος και αφαιρείται κατά την προετοιμασία. Το μόριο είναι ίδιο και στις δύο μορφές: η επιλογή είναι θέμα οργάνωσης του εργαστηρίου.

Τι ελέγχετε πριν συγκρίνετε τα δύο;

• Το πιστοποιητικό ανάλυσης της συγκεκριμένης παρτίδας, πριν από κάθε ποσοτική σύγκριση.
• Τον διαλύτη και τη συμβατότητά του με το ρυθμιστικό διάλυμα της δοκιμασίας σας.
• Την ετικέτα κάθε stock: ένωση, συγκέντρωση, διαλύτης, ημερομηνία.
• Τους κύκλους κατάψυξης και απόψυξης, που αποφεύγονται με μικρά κλάσματα.

Κάθε παρτίδα της PureChems ελέγχεται με HPLC και φασματομετρία μάζας από ανεξάρτητο εργαστήριο, με καθαρότητα ≥99%. Πώς διαβάζεται το έγγραφο, θα δείτε στον οδηγό για το πιστοποιητικό ανάλυσης πεπτιδίων. Για τη σκόνη θα σας χρειαστεί και ο οδηγός ανασύστασης. Αν σας ενδιαφέρει γενικότερα η έρευνα της οξειδοαναγωγικής ισορροπίας, δείτε και τη γλουταθειόνη σε διάλυμα.

Συχνές ερωτήσεις

Είναι το NAD+ και το 5-amino-1MQ το ίδιο είδος υλικού;

Όχι. Το NAD+ είναι ενδογενές συνένζυμο, ενώ το 5-amino-1MQ είναι συνθετικός αναστολέας του ενζύμου NNMT. Συζητιούνται μαζί επειδή και τα δύο αγγίζουν τον μεταβολισμό του NAD, όμως απαντούν σε διαφορετικά ερωτήματα.

Πού συναντιούνται οι δύο ενώσεις;

Στο νικοτιναμίδιο. Το NNMT το μεθυλιώνει και το απομακρύνει από τον δρόμο ανακύκλωσης, ενώ η σύνθεση του NAD+ το χρειάζεται.

Ποιο από τα δύο έχει μελετηθεί περισσότερο;

Το NAD+, με διαφορά. Το 5-amino-1MQ έχει μικρότερη και πιο πρόσφατη βιβλιογραφία, κυρίως στη χημεία των αναστολέων του NNMT και στον μεταβολισμό των λιποκυττάρων.

Είναι κάποιο από τα δύο εγκεκριμένο φάρμακο ή συμπλήρωμα;

Όχι. Κανένα δεν έχει άδεια κυκλοφορίας ως φάρμακο στην ΕΕ. Ένα ερευνητικό φιαλίδιο NAD+ δεν είναι συμπλήρωμα διατροφής, και το 5-amino-1MQ είναι υπό διερεύνηση ουσία με προκλινική μόνο βιβλιογραφία.

Βρίσκεται κάποιο από τα δύο στη λίστα του WADA;

Κανένα δεν αναφέρεται ονομαστικά στη δημοσιευμένη λίστα απαγορευμένων ουσιών του Παγκόσμιου Οργανισμού Αντιντόπινγκ. Ο WADA όμως έχει γενικές κατηγορίες για ουσίες χωρίς έγκριση για θεραπευτική χρήση σε ανθρώπους, και το 5-amino-1MQ ως υπό διερεύνηση ουσία θα έμπαινε σε τέτοια κατηγορία. Η λίστα αναθεωρείται κάθε χρόνο, οπότε μόνο η τρέχουσα έκδοση είναι αξιόπιστη πηγή.

Κάψουλες ή σκόνη για το 5-amino-1MQ;

Η σκόνη σε φιαλίδιο ταιριάζει σε εργασία με ακριβείς όγκους. Οι κάψουλες ταιριάζουν όταν θέλετε προμετρημένες μονάδες που μένουν ξηρές μέχρι τη χρήση. Το μόριο είναι το ίδιο.

Αποκλειστικά για ερευνητική χρήση. Δεν προορίζεται για ανθρώπινη ή ζωική κατανάλωση.