Lühidalt: COA sertifikaat ehk analüüsisertifikaat on ühe tootmispartii analüüsiaruanne. Sellest näed, millised testid tehti, mis tulemused saadi ja millise nõudega neid võrreldi. Peptiidi puhul on kõige tähtsamad HPLC puhtus, massispektromeetriaga kinnitatud molekulmass ja partii number, mis peab ühtima viaalil oleva numbriga.
Kui tellid laborisse uurimispeptiidi, tuleb viaaliga kaasa ka dokument. See paber on sageli olulisem kui pakend ise, sest just sellest selgub, mis viaalis tegelikult on. Samas loetakse COA-d tihti valesti. Number „99% puhtus“ kaalub väga erinevalt sõltuvalt sellest, millise meetodiga see saadi, kuidas analüüs tehti ja mis on ülejäänud üks protsent.
Selles juhendis vaatame läbi, mis peptiidi analüüsisertifikaadil kirjas on, mida iga mõõtmine tegelikult näitab ja kuidas hinnata, kas dokument toetab toote kohta öeldut. Juhend kehtib kogu kataloogi kohta, mitte ainult ühe ühendi kohta.
COA tuleb ingliskeelsest nimetusest certificate of analysis, eesti keeles analüüsisertifikaat. See on kokkuvõttev aruanne ühe kindla tootmispartii kohta: millised testid tehti, mis tulemused saadi ja millise spetsifikatsiooniga tulemusi võrreldi.
Kuna sertifikaat on partiipõhine, on sellel mõte ainult siis, kui dokumendi partii number ühtib viaalil oleva numbriga. Üldine COA, millel partii numbrit pole või mille number ei vasta käes olevale materjalile, ei võimalda ainet jälgida. Sellist paberit tasub võtta kui turundusmaterjali, mitte kui analüüsitulemust.
Põhjalik COA sünteetilise peptiidi kohta sisaldab tavaliselt järgmisi andmeid.
HPLC on kõrgefektiivne vedelikkromatograafia. Proov surutakse kõrge rõhu all läbi kolonni ja selle koostisosad eralduvad, sest need seonduvad kolonni täidisega erineva tugevusega. Detektor registreerib iga eraldunud aine piigina. Puhtus arvutatakse nii, et sihtpeptiidi piigi pindala jagatakse kõigi integreeritud piikide kogupindalaga.
Kui COA-l on kirjas 99%, tähendab see enamasti, et sihtpeptiidi piik moodustas antud lainepikkusel 99% kõigi piikide pindalast. See on suhteline mõõt. See kirjeldab ainult neid peptiidiga seotud aineid, mida meetod nägi.
Peptiide mõõdetakse kõige sagedamini 214 nm juures, kus neelab peptiidside, või 220 nm juures. Lisand, mis valitud lainepikkusel valgust hästi ei neela, jääb integreerimisel alaesindatuks. Seepärast peab korralik COA lainepikkuse ära märkima.
See on COA juures kõige suurem segaduse allikas. Kromatograafiline puhtus näitab, kui suur osa tuvastatud peptiidsest materjalist on sihtpeptiid. Peptiidisisaldus näitab, kui suur osa viaali kogu kuivmassist on üldse peptiid.
Lüofiliseeritud sünteetiline peptiid ei ole massi järgi peaaegu kunagi puhas peptiid. Pulbris on ka käsitsemisel imendunud vett, jääksoolasid ja puhastamisest pärit vastasioone. Preparatiivses puhastamises kasutatakse tavaliselt trifluoroäädikhapet, mis jääb valmis pulbris aluseliste aminohapete külge. Seega võib materjali HPLC puhtus olla täiesti ausalt 98%, samal ajal kui peptiid ise moodustab kaalutud pulbrist märksa väiksema osa. Mõlemad numbrid on õiged, need vastavad lihtsalt eri küsimustele.
Massispektromeetria kinnitab identsust: mõõdetud molekulmassi võrreldakse järjestuse põhjal arvutatud massiga. Kui need klapivad, on viaalis õige molekul. Massispekter üksi ei ütle aga, kui palju on proovis muid aineid. Seepärast käivad HPLC ja massispektromeetria koos. Üks vastab küsimusele, kui puhas aine on, teine küsimusele, kas see on õige aine.
Avaldatud peptiidianalüüsi töödes kordub sama mõte: üks meetod ei tõenda korraga nii identsust kui ka puhtust. Usaldusväärse pildi annavad teineteist täiendavad meetodid, tavaliselt HPLC koos massispektromeetriaga ning vahel ka kapillaarelektroforees või TMR-spektroskoopia.
Veesisaldust mõõdetakse Karl Fischeri tiitrimise või kuivamiskao meetodiga. Lüofiliseeritud pulber on hügroskoopne, nii et see number muutub koos käsitsemise ja hoiustamisega. Ka välimus loeb. Kui pulber, mis peaks olema valge ja kohev, on värvunud või tükkis, tasub põhjus enne katset välja selgitada.
Toorandmed ehk kromatogramm ja spekter on alati informatiivsemad kui tabel, sest nende põhjal saad ise hinnata piigi kuju, baasjoont ja integreerimist.
Analüüsisertifikaat kirjeldab ühe reagendipartii analüütilisi omadusi. See ei ole müügiluba ega ohutuse tõend ning ei ütle midagi selle kohta, kas ainet võiks elusorganismile manustada. Puhtus ja ohutus on eri mõisted. Nende segamine on COA tõlgendamisel kõige sagedasem viga.
Hoia sertifikaat partii dokumentide juures koos vastuvõtmise ja lahustamise kuupäevaga. Nii saad analüüsitulemuse ka kuude pärast konkreetse materjaliga siduda. Ilma selleta ei saa ootamatut katsetulemust ainega kindlalt seostada. Kuidas pulbrit ja lahust õigesti hoida, loe juhendist peptiidide hoiustamine laboris. Puhtusprotsendi tagamaid selgitab pikemalt artikkel peptiidi puhtus ja HPLC.
PureChemsi iga partii puhtust ja identsust kontrollib sõltumatu labor HPLC ja massispektromeetriaga ning puhtus on vähemalt 99%. Iga partii kohta on olemas COA. Nii on see näiteks BPC-157, TB-500 ja Retatrutide puhul. Kasuta ka meie dokumentide juures ülaltoodud kuut küsimust ja kontrolli, et partii number viaalil ja sertifikaadil ühtiks.
Saadame ELi seest diskreetses pakendis ja jälgimiskoodiga. Maksta saad kaardiga, Google Pay'ga või krüptorahaga.
Enamasti seda, et HPLC kromatogrammis moodustas sihtpeptiidi piik antud lainepikkusel 99% kõigi integreeritud piikide pindalast. See ei tähenda, et 99% viaali massist oleks peptiid, sest vett, soolasid ja vastasioone see meetod ei mõõda.
Puhtus näitab, kui suur osa tuvastatud peptiidsest materjalist on sihtjärjestus. Peptiidisisaldus näitab peptiidi osakaalu kogu kuivmassist. Neid mõõdetakse eri meetoditega ja põhjalik COA esitab mõlemad.
Sellist dokumenti ei saa käes oleva materjaliga siduda. Ka ainult kokkuvõtlik tabel ilma kromatogrammi ja spektrita ei luba andmeid ise hinnata. Kumbki ei tõesta veel probleemi, kuid muudab dokumendi väiteks, mitte kontrollitavaks tõendiks.
Ei. COA on partii analüüsidokument ja sellel puudub regulatiivne tähendus. Uurimiskemikaalidena müüdavaid ühendeid ei ole Euroopa Ravimiamet ega riiklikud ametid inimestel ega loomadel kasutamiseks hinnanud.
Ainult teadusuuringuteks. Mitte inimestele ega loomadele tarbimiseks.
Lüofiliseeritud peptiid püsib kõige paremini suletud viaalis külmas, kuivas ja pimedas, lahus aga on lühiajaline töövaru. Juhend selgitab, mis peptiidi lagundab ja kuidas hoiutingimusi dokumenteerida.
Loe artiklit
Semax ja Selank on sünteetilised seitsmest aminohappest koosnevad peptiidid sama stabiliseeriva Pro-Gly-Pro lõpuga. Semax on tuletatud ACTH fragmendist ja seotud kognitsiooni uuringutega, Selank tuftsiinist ja seotud ärevuse ning immuunsignaali uuringutega; artikkel võrdleb neid ja selgitab vormi ning hoiustamist.
Loe artiklit
GHK-Cu ostmisel uurimistööks tasub kontrollida sõltumatu labori analüüsisertifikaati, HPLC puhtust ja massispektromeetriaga kinnitatud identsust. Artikkel selgitab, mis on GHK-Cu, mille poolest erinevad üksik viaal ja GLOW segu ning kuidas toimub tarne Eestisse.
Loe artiklit