Att rekonstituera peptider betyder att tillsätta en uppmätt mängd lösningsmedel till ett frystorkat pulver så att det blir en lösning med känd koncentration. Det vanligaste lösningsmedlet är bakteriostatiskt vatten. Peptider som löser sig dåligt i neutralt vatten löses ofta i utspädd ättiksyra. Lösningsmedlet ska riktas mot flaskans insida, och flaskan ska snurras försiktigt, aldrig skakas.
Den här guiden går igenom hela arbetsgången i laboratoriet: hur du väljer lösningsmedel, hur du räknar ut koncentrationen och hur du gör, steg för steg.
De flesta forskningspeptider levereras frystorkade, även kallat lyofiliserade. Vattnet har tagits bort under vakuum i kyla, och kvar blir ett torrt pulver eller en tunn, nästan osynlig hinna i botten av glasflaskan. I torr form håller peptiden betydligt längre än i lösning.
Innan peptiden kan delas upp, analyseras eller användas i ett försök måste den lösas igen. Två saker avgör hur väl det går: löslighet, alltså om ämnet löser sig helt, och stabilitet, alltså om det håller sig intakt i lösningen.
Det korta svaret: det som står i analyscertifikatet eller produktdokumentationen för just din peptid. Olika peptider har olika löslighet, och ingen regel gäller för alla. De två vanligaste valen är:
Bakteriostatiskt vatten (BAC-vatten) är sterilt vatten med 0,9 % bensylalkohol som konserveringsmedel. Bensylalkoholen hämmar bakterietillväxt när samma flaska öppnas flera gånger. Vattnet har ett nästan neutralt pH och fungerar för de flesta peptider som redan löser sig bra i vatten. Därför är det standardvalet. Läs mer i artikeln om bakteriostatiskt vatten för peptider. Bakteriostatiskt vatten 10 ml förvaras i rumstemperatur, 15 till 25 °C.
Utspädd ättiksyra ger en svagt sur miljö. Vissa peptider, särskilt de som är kladdiga, klumpar ihop sig eller löser sig dåligt vid neutralt pH, löser sig lättare då. Studier inom formuleringsvetenskap har rapporterat att peptiders löslighet och stabilitet ofta är bättre vid svagt surt pH. Ättiksyra används därför oftast som hjälp för svårlösta peptider och inte som förstahandsval. Ättiksyra 0,6 % 10 ml förvaras i rumstemperatur.
| Bakteriostatiskt vatten | Ättiksyra 0,6 % | |
|---|---|---|
| Innehåll | Sterilt vatten med 0,9 % bensylalkohol | 0,6 % ättiksyra i lösning |
| pH | Nästan neutralt | Svagt surt |
| Passar för | Peptider som löser sig bra i vatten | Svårlösta peptider som klumpar ihop sig |
| Fördel | Flaskan kan öppnas flera gånger med mindre risk för bakterier | Hjälper peptiden att lösa sig helt |
Vanligt sterilt vatten går också att använda, men det saknar konserveringsmedel och skyddar inte mot bakterier om flaskan öppnas igen.
Koncentrationen bestäms av hur mycket lösningsmedel du tillsätter till en känd mängd pulver:
Koncentration = mängd peptid ÷ volym lösningsmedel
Ett exempel: 10 mg pulver löst i 2 ml lösningsmedel ger 5 mg/ml. Samma 10 mg i 1 ml ger 10 mg/ml. Mät alltid volymen noggrant med en kalibrerad pipett eller spruta, uppskatta den aldrig. Ett litet fel i volymen ger ett lika stort fel i alla mätningar som bygger på lösningen.
GHK-Cu är en kopparpeptid som levereras som frystorkat pulver, 100 mg per flaska, och förvaras i 2 till 8 °C skyddad mot ljus. Eftersom flaskan innehåller mer pulver än de flesta peptider blir det extra viktigt att räkna ut volymen innan du börjar. Kopparn ger lösningen en blå färg, så en klar, jämnt blå lösning är ett gott tecken på att pulvret har löst sig.
En löst peptid håller betydligt kortare tid än pulvret. För de flesta peptider räknas hållbarheten i lösning i veckor i kylskåp, inte i månader. Temperatur, ljus, pH och upprepad frysning och upptining är de vanligaste orsakerna till att en peptid bryts ned. Lös därför bara upp den mängd du behöver inom en rimlig tid, och förvara resten som pulver.
Torrt pulver förvaras svalt eller fryst, skyddat mot ljus och fukt, i den förseglade flaskan. Hos PureChems anges förvaringstemperaturen på varje produktsida, och varje batch har ett eget analyscertifikat med minst 99 % renhet, kontrollerad med HPLC och masspektrometri av ett oberoende labb.
Fler guider om enskilda peptider: BPC-157 vs TB-500, bioregulatorer och GHRP-2 vs GHRP-6.
Att lösa ett frystorkat pulver i ett lösningsmedel så att det blir en lösning med känd koncentration.
Bakteriostatiskt vatten för peptider som löser sig bra i vatten. Utspädd ättiksyra för svårlösta peptider som klumpar ihop sig vid neutralt pH. Följ alltid dokumentationen för din peptid.
Nej. Snurra försiktigt eller låt flaskan stå tills pulvret löst sig. Kraftig skakning kan skada peptiden.
Peptiden har inte löst sig helt eller har börjat klumpa ihop sig. Ge den mer tid, och kontrollera om dokumentationen rekommenderar ett svagt surt lösningsmedel.
Ja, men det saknar konserveringsmedel. Det passar därför bäst när hela lösningen ska användas på en gång.
I kylskåp, skyddad mot ljus, uppdelad i alikvoter och tydligt märkt med ämne, koncentration, lösningsmedel och datum.
Endast för forskningsändamål. Ej avsedd att förtäras av människor eller djur.
Hos PureChems köper du Cardarine (GW-501516) för forskning i kapslar om 10 mg, med minst 99 % renhet och analyscertifikat för varje batch. Artikeln förklarar vad ämnet är, vad som ingår och hur det skiljer sig från Fitorine och SLU-PP-332.
Läs artikeln
Hos PureChems köper du TUDCA för forskning i kapslar om 500 mg, 60 stycken per burk, med minst 99 % renhet och analyscertifikat för varje batch. Här är vad TUDCA är, vad som ingår och hur du kontrollerar kvaliteten.
Läs artikeln
GHRP-2 och GHRP-6 är två syntetiska hexapeptider som aktiverar samma receptor som hormonet ghrelin. Artikeln jämför struktur, forskningsresultat och användning i studier, och visar var Ipamorelin passar in.
Läs artikeln