Alla produkter är endast avsedda för forsknings- och samlarändamål. Ej för förtäring. 18+Endast för forskning. Ej för förtäring. 18+

Vad är ett COA? Så läser du ett analyscertifikat för peptider

Ett COA (Certificate of Analysis) är ett analyscertifikat som visar vilka tester en viss batch har genomgått och vilka resultat den fick. För peptider innehåller det normalt renhet enligt HPLC och identitet enligt masspektrometri, kopplat till ett batchnummer. Ett analyscertifikat är bara värt något om batchnumret på dokumentet stämmer med numret på flaskan du har framför dig.

COA är det mest informativa dokumentet som följer med en forskningspeptid, men också ett av de mest missförstådda. En siffra som "99 % renhet" kan betyda olika saker beroende på metod. Här går vi igenom vad som står på ett analyscertifikat, vad siffrorna faktiskt mäter och vilka frågor du ska ställa till dokumentet.

Vad är ett analyscertifikat för peptider?

Ett analyscertifikat är en sammanfattande rapport för en specifik tillverkningsbatch. Det redovisar vilka tester som gjordes, vilka resultat som uppmättes och vilken specifikation resultaten jämfördes med. Eftersom det gäller en enda batch är det spårbarheten som ger det värde. Ett allmänt certifikat utan batchnummer, eller med ett nummer som inte matchar flaskan, är i praktiken ett marknadsföringsblad och inget analytiskt bevis.

Vad står på ett COA?

Ett någorlunda komplett analyscertifikat för en syntetisk peptid innehåller ofta följande:

  • Produktnamn och sekvens, inklusive eventuella modifieringar. Thymosin Alpha 1 har till exempel en acetylgrupp i ena änden, och den ändrar både massan och beteendet i analysen.
  • Batch- eller lotnummer och tillverkningsdatum. Det är ankaret för allt annat på sidan.
  • Summaformel och teoretisk molmassa, som resultatet från masspektrometrin jämförs med.
  • Utseende, oftast vitt till benvitt frystorkat pulver.
  • Renhet och metod, vanligen HPLC med omvänd fas, redovisad som areaprocent.
  • Identitet, normalt masspektrometri med uppmätt massa mot teoretisk massa.
  • Kompletterande tester, till exempel vattenhalt, restlösningsmedel, motjon och peptidinnehåll.

Hur läser man HPLC-renheten?

HPLC (vätskekromatografi) separerar ämnena i ett prov och visar dem som toppar i ett kromatogram. Renheten anges som den andel av den totala toppytan som målpeptiden står för, vid en viss våglängd. Oftast används 214 nm, där peptidbindningen absorberar ljus, eller 220 nm. Våglängden ska stå på certifikatet, eftersom föroreningar som inte syns vid den våglängden blir underskattade.

När det står ≥99 % betyder det alltså att målpeptiden utgjorde minst 99 % av den peptidrelaterade signalen i analysen. Det betyder inte att 99 % av pulvrets vikt är peptid.

Renhet är inte samma sak som innehåll

Det här är den vanligaste missuppfattningen. Kromatografisk renhet säger hur stor del av det detekterade peptidmaterialet som är rätt peptid. Peptidinnehåll säger hur stor del av pulvrets totala vikt som är peptid över huvud taget. Frystorkat pulver innehåller också vatten, salter och motjoner från reningen, oftast trifluoracetat, ibland utbytt mot acetat. Båda siffrorna är korrekta men svarar på olika frågor, och ett grundligt certifikat redovisar båda.

Vad visar masspektrometrin?

Masspektrometri bekräftar identiteten genom att jämföra den uppmätta massan med den teoretiska massan för sekvensen. Den visar att rätt molekyl finns i provet, men inte hur mycket av något annat som finns där. Därför kompletterar HPLC och masspektrometri varandra: den ena svarar på frågan om renhet, den andra på frågan om identitet. Publicerade analysstudier visar gång på gång att en enda metod sällan räcker för båda.

Vanliga föroreningar i syntetiska peptider

  • Sekvenser där en aminosyra saknas eller där kedjan har brutits av i förtid.
  • Molekyler där skyddsgrupper från syntesen inte har tagits bort helt.
  • Oxiderade metionin- eller cysteinrester.
  • Deamiderade asparagin- eller glutaminrester.

Vattenhalt och utseende

Vattenhalten bestäms med Karl Fischer-titrering eller genom torkförlust. Frystorkat pulver drar åt sig fukt, så siffran påverkas av hur materialet har hanterats och förvarats. Utseendet är en enkel men användbar kontroll: missfärgning eller klumpar i ett pulver som borde vara en vit, lös kaka är ett skäl att undersöka saken innan analysarbetet börjar.

Sex frågor att ställa till ett analyscertifikat

  1. Stämmer batchnumret på certifikatet med numret på flaskan?
  2. Är analysen daterad, och står det vilket laboratorium som gjorde den?
  3. Finns själva kromatogrammet och masspektrumet med, eller bara en sammanfattande tabell?
  4. Är detektionsvåglängden angiven för HPLC-renheten?
  5. Redovisas peptidinnehåll och vattenhalt separat från renheten?
  6. Stämmer den uppmätta massan med den teoretiska massan för sekvensen, inklusive modifieringar?

Ett certifikat som saknar kromatogram är inte nödvändigtvis fel, men det gör att du inte kan bedöma toppformen, baslinjen och integreringen själv. Då blir dokumentet ett påstående snarare än ett bevis.

Vad ett COA inte visar

Ett analyscertifikat dokumenterar de analytiska egenskaperna hos en batch. Det är inget godkännande, inget bevis på säkerhet och säger ingenting om lämplighet för användning på levande organismer. Ett material kan ha ett helt korrekt certifikat med hög renhet och rätt massa och ändå vara strikt ett laboratoriereagens. Renhet och säkerhet är olika saker.

Analyscertifikat hos PureChems

Hos PureChems testas varje batch av ett oberoende laboratorium med HPLC och masspektrometri, och varje batch håller minst 99 % renhet. Analyscertifikatet finns för varje batch. På produktsidorna står dessutom ett testnummer, till exempel BPC-2501-A för BPC-157 och GHK-2501-A för GHK-Cu, tillsammans med summaformel, molmassa och förvaring.

För större peptider som Retatrutide är certifikatet extra viktigt, eftersom det är där identitet och renhet för den aktuella batchen definieras. Hur Retatrutide skiljer sig från tirzepatid förklarar vi i Retatrutide vs tirzepatid.

Spara certifikatet med batchen

Förvara analyscertifikatet tillsammans med batchnumret, mottagningsdatum och datum för upplösning. Då kan du spåra ett oväntat resultat månader senare. Frystorkat pulver drar åt sig fukt, så vattenhalten kan ändras med hanteringen. Låt kalla flaskor nå rumstemperatur innan de öppnas. Läs mer om lösningsmedel i guiden om bakteriostatiskt vatten.

Vanliga frågor om analyscertifikat

Vad står COA för?

Certificate of Analysis, på svenska analyscertifikat. Det är en rapport över de tester som gjorts på en viss batch.

Vad betyder 99 % renhet på en peptid?

Att målpeptiden stod för 99 % av den totala toppytan i HPLC-analysen vid angiven våglängd. Det är ett relativt mått och säger inte hur stor del av pulvrets vikt som är peptid.

Vad är skillnaden mellan HPLC och masspektrometri?

HPLC mäter renheten, masspektrometri bekräftar identiteten. Ett trovärdigt certifikat använder båda.

Kan jag lita på ett COA utan batchnummer?

Nej. Utan batchnummer går certifikatet inte att koppla till materialet du har fått.

Får jag ett analyscertifikat när jag köper peptider från PureChems?

Ja, det finns ett analyscertifikat för varje batch.

Vad är en motjon på ett analyscertifikat?

Ett salt som följer med peptiden från reningen, oftast trifluoracetat och ibland acetat. Det räknas inte in i renheten utan redovisas separat.

Endast för forskningsändamål. Ej avsedd att förtäras av människor eller djur.

Ämnen i den här artikeln

Se sortimentetAlla artiklar

Läs vidare