Bakteriostatická voda: k čemu slouží při rekonstituci peptidů

Bakteriostatická voda je sterilní voda s malým přídavkem konzervační látky, obvykle 0,9 % benzylalkoholu, která brzdí růst bakterií. V laboratoři slouží jako nejběžnější rozpouštědlo pro rekonstituci lyofilizovaných peptidů. Díky konzervační látce zůstává roztok použitelný déle než ve sterilní vodě bez přísad, a to i když z lahvičky odebíráte opakovaně.

V tomto článku najdete, co přesně bakteriostatická voda obsahuje, kdy je vhodná a kdy ne, jak v ní peptid rozpustit krok za krokem a jak hotový roztok uchovat. Vše se týká laboratorní práce s výzkumnými činidly.

Co je bakteriostatická voda?

Bakteriostatická voda je sterilní voda pro laboratorní použití, do které se přidává benzylalkohol jako konzervační látka. Slovo „bakteriostatický“ znamená, že látka bakterie přímo nezabíjí, ale brání jejich množení. V angličtině se jí říká bacteriostatic water, zkráceně BAC water.

Má téměř neutrální pH, a proto se snáší s velkou částí výzkumných peptidů. To z ní dělá univerzální rozpouštědlo, po kterém laboratoř sáhne jako první, pokud dokumentace ke konkrétnímu peptidu neříká jinak.

Čím se liší od sterilní a destilované vody?

Destilovaná voda z drogerie není sterilní a nemá ochranu proti mikrobům. Pro práci s peptidy se proto nehodí, i když na první pohled vypadá stejně.

Sterilní voda bez přísad zůstává sterilní jen do chvíle, kdy zátku poprvé propíchnete. Každý další vpich jehly do zátky představuje riziko, že se do ní dostanou mikroorganismy, a nic je tam nezastaví. Proto se sterilní voda bez konzervace používá spíše tehdy, když připravíte roztok najednou a celý ho hned zpracujete, nebo když dokumentace k peptidu benzylalkohol výslovně nedoporučuje.

K čemu slouží bakteriostatická voda při práci s peptidy?

Většina výzkumných peptidů se dodává jako lyofilizovaný, tedy mrazem sušený prášek. Často jde jen o tenkou, téměř neviditelnou vrstvu na dně skleněné lahvičky. Než s ním můžete pracovat, rozdělit ho na alikvoty nebo ho analyzovat, musíte ho převést zpět do roztoku o známé koncentraci. Tomuto kroku se říká rekonstituce.

Bakteriostatická voda má při rekonstituci tři praktické výhody:

• Delší použitelnost roztoku: benzylalkohol omezuje růst mikroorganismů v připraveném roztoku.
• Bezpečnější opakovaný odběr: při několikanásobném propíchnutí zátky je riziko kontaminace nižší než u vody bez přísad.
• Široká snášenlivost: díky téměř neutrálnímu pH se hodí pro peptidy, které se ve vodě rozpouštějí dobře, například BPC-157.

Jak rozpustit peptid v bakteriostatické vodě: postup krok za krokem

Následující postup popisuje běžnou laboratorní praxi. Vždy má přednost pokyn uvedený v certifikátu analýzy (COA) nebo v dokumentaci ke konkrétnímu peptidu.

1. Nechte lahvičku ohřát na pokojovou teplotu. Pokud otevřete studenou lahvičku z lednice, na prášek zkondenzuje vzdušná vlhkost a urychlí jeho rozklad.
2. Odměřte přesný objem. Výsledná koncentrace závisí na objemu přidaného rozpouštědla, proto ho měřte, neodhadujte.
3. Přidávejte pomalu po stěně. Vodu směrujte na vnitřní stěnu lahvičky, ne přímo na prášek.
4. Nechte prášek rozpustit samovolně. Lahvičkou nanejvýš jemně zakružte. Netřepejte a nepoužívejte vortex, mechanické namáhání může poškodit křehké peptidové řetězce.
5. Zkontrolujte roztok. Má být čirý. Zákal nebo nerozpuštěné částice mohou znamenat, že peptid potřebuje jiné rozpouštědlo.
6. Označte lahvičku. Zapište látku, koncentraci, použité rozpouštědlo a datum rekonstituce.

Jak spočítat koncentraci roztoku?

Koncentrace se počítá jako hmotnost peptidu dělená objemem rozpouštědla. Pokud například rozpustíte 10 mg prášku ve 2 ml bakteriostatické vody, získáte roztok o koncentraci 5 mg/ml. Ve 4 ml by to bylo 2,5 mg/ml. Hmotnost peptidu v lahvičce najdete na etiketě a v certifikátu analýzy.

Kdy bakteriostatická voda nestačí?

Některé peptidy jsou lepivé, mají sklon ke shlukování nebo se při neutrálním pH rozpouštějí špatně. V takovém případě zůstane roztok zakalený a peptid se nerozpustí úplně. Pak se používá mírně kyselé rozpouštědlo, typicky kyselina octová 0,6 %.

Která volba je správná, rozhoduje profil rozpustnosti konkrétní látky, ne obecné pravidlo. Podrobné srovnání obou rozpouštědel najdete v článku Kyselina octová 0,6 % nebo bakteriostatická voda.

Jak skladovat bakteriostatickou vodu a hotový roztok?

Neotevřenou bakteriostatickou vodu skladujte při pokojové teplotě 15 až 25 °C a chraňte ji před kontaminací. Zátku před každým odběrem otřete a do lahvičky nikdy nevracejte nic, co z ní už vyšlo.

S rozpuštěným peptidem je to jinak. Roztok je vždy méně stabilní než suchý prášek, a proto patří do lednice a měl by se spotřebovat v době, kterou udává dokumentace. Opakované zmrazování a rozmrazování poškozuje peptidové řetězce, a tak se roztok obvykle rovnou dělí do menších alikvotů. Víc o teplotě, světle a stabilitě píšeme v článku Skladování peptidů v laboratoři.

Bakteriostatická voda pro laboratoř: na co se dívat při výběru

Bakteriostatická voda vypadá jako obyčejná voda, takže o kvalitě rozhodují údaje, které na první pohled nevidíte:

• Uvedené složení: prodejce má uvádět konzervační látku a její koncentraci.
• Sterilní balení: skleněná lahvička se sterilním uzávěrem, ze které odebíráte bez přelévání.
• Dokumentace k šarži: certifikát analýzy, který lze přiřadit k číslu šarže na lahvičce. Jak takový dokument číst, vysvětluje článek Certifikát analýzy (COA) u peptidů.

Naše bakteriostatická voda 10 ml je sterilní vodný roztok s 0,9 % benzylalkoholu v 10ml skleněné lahvičce se sterilním uzávěrem. Ke každé šarži je k dispozici certifikát analýzy. Zásilky odesíláme diskrétně a se sledováním v rámci EU, zaplatit můžete kartou, přes Google Pay nebo kryptoměnou.

Časté otázky o bakteriostatické vodě

K čemu se používá bakteriostatická voda?

K rekonstituci, tedy rozpouštění lyofilizovaných výzkumných peptidů. Konzervační látka prodlužuje dobu, po kterou je roztok použitelný.

Co obsahuje bakteriostatická voda?

Sterilní vodu a benzylalkohol jako konzervační látku, obvykle v koncentraci 0,9 %.

Proč je v bakteriostatické vodě právě benzylalkohol?

Benzylalkohol je osvědčená konzervační látka, která v nízké koncentraci brzdí množení bakterií a přitom zachovává téměř neutrální pH roztoku. Díky tomu lze z jedné lahvičky odebírat opakovaně.

Je BAC water totéž co bakteriostatická voda?

Ano. BAC water je anglická zkratka pro bakteriostatickou vodu.

Mohu místo ní použít destilovanou vodu?

Ne. Destilovaná voda není sterilní a neobsahuje konzervační látku, takže roztok není chráněný proti kontaminaci.

Hodí se bakteriostatická voda na každý peptid?

Ne vždy. Některé peptidy vyžadují čistou vodu nebo zředěnou kyselinu, například kyselinu octovou 0,6 %. Rozhoduje dokumentace ke konkrétní látce.

Kolik bakteriostatické vody přidat k peptidu?

Univerzální číslo neexistuje. Objem volíte podle koncentrace, kterou pro laboratorní práci potřebujete, a podle dokumentace k peptidu. Důležité je objem přesně odměřit a zapsat.

Proč lahvičkou s peptidem netřepat?

Prudké třepání a vortex mechanicky namáhají peptidové řetězce a podporují jejich shlukování. Stačí jemně zakroužit a nechat prášek rozpustit samovolně.

Je bakteriostatická voda určena pro lidi?

Ne. Jde o laboratorní činidlo výhradně pro výzkum.

Pouze pro výzkumné účely. Není určeno k lidské ani zvířecí spotřebě.