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Certificat d'analyse (COA) d'un peptide : comment le lire

En bref : le certificat d'analyse d'un peptide (COA, pour certificate of analysis) est le rapport des tests réalisés sur un lot de production précis. Il indique l'identité du peptide, sa pureté mesurée par HPLC, sa masse vérifiée par spectrométrie de masse et parfois sa teneur en eau ou en sel. Il n'a de valeur que si son numéro de lot correspond à celui de votre flacon.

Le COA est le document le plus utile qui accompagne un peptide de recherche. C'est aussi l'un des plus mal lus. Un « 99 % de pureté » n'a pas le même poids selon la méthode utilisée et selon ce que représente le 1 % restant. Ce guide vous apprend à lire un COA ligne par ligne.

Qu'est-ce qu'un certificat d'analyse de peptide ?

Un COA est un rapport de synthèse établi pour un lot de production. Il liste les tests réalisés sur ce lot, les résultats obtenus et la spécification à laquelle chaque résultat est comparé.

Comme il est propre à un lot, il n'a de sens que si le numéro de lot du document est le même que celui du flacon. Un COA générique sans numéro de lot, ou dont le numéro ne correspond pas au produit, n'offre aucune traçabilité. Il faut alors le traiter comme un document commercial, pas comme une preuve analytique.

Que doit contenir un certificat d'analyse de peptide ?

RubriqueCe qu'elle indiqueCe que vous vérifiez
Nom et séquenceSéquence en code à une ou trois lettres, avec les modifications (acétylation N-terminale, amidation C-terminale)Que la séquence est celle du peptide commandé
Numéro de lot et dateL'ancre de traçabilité de tout le documentQu'il correspond au flacon
Formule et masse théoriqueLa masse calculée, référence pour la spectrométrie de masseQu'elle correspond à la séquence annoncée
AspectSouvent « poudre lyophilisée blanche à blanc cassé »Que votre poudre a bien cet aspect
Pureté et méthodeEn général HPLC en phase inverse, en pourcentage de surfaceQue la méthode et la longueur d'onde sont précisées
IdentitéMasse observée par spectrométrie de masseQu'elle est cohérente avec la masse théorique
Tests annexesTeneur en eau, solvants résiduels, contre-ion, teneur en peptideQu'ils sont donnés à part de la pureté

Pureté et teneur en peptide : quelle différence ?

C'est la confusion la plus fréquente. La pureté chromatographique indique quelle part du matériel peptidique détecté correspond au peptide visé. La teneur en peptide indique quelle part de la masse sèche totale du flacon est du peptide.

Une poudre lyophilisée n'est presque jamais du peptide pur en masse. Elle contient aussi de l'eau absorbée, des sels résiduels et des contre-ions issus de la purification, le plus souvent du trifluoroacétate (TFA). Un lot peut donc afficher une pureté HPLC très élevée alors que le peptide ne représente qu'une partie de la masse pesée. Les deux chiffres sont justes : ils répondent à deux questions différentes. Un COA complet donne les deux.

Comment lire la pureté HPLC sur un COA ?

La pureté HPLC correspond à la surface du pic du peptide visé, divisée par la surface totale des pics intégrés, à une longueur d'onde donnée. Cette longueur d'onde est le plus souvent 214 nm, qui détecte la liaison peptidique, ou 220 nm. Elle compte : une impureté qui absorbe peu à cette longueur d'onde sera sous-estimée.

Le détail est dans notre article pureté HPLC et spectrométrie de masse : ce que 99 % veut dire.

À quoi sert la spectrométrie de masse sur un COA ?

Elle confirme l'identité. L'appareil mesure la masse de la molécule présente et la compare à la masse théorique de la séquence, modifications comprises. Si les deux concordent, c'est la bonne molécule. En revanche, la spectrométrie de masse ne dit pas, à elle seule, quelle quantité d'autres substances est présente. C'est pour cela qu'on l'associe à l'HPLC.

Les 6 questions à poser à tout COA

  1. Le numéro de lot du document correspond-il à celui du flacon ?
  2. L'analyse est-elle datée, et le laboratoire qui l'a réalisée est-il identifié ?
  3. Le chromatogramme et le spectre de masse sont-ils joints, ou seulement un tableau de résultats ?
  4. La longueur d'onde de détection HPLC est-elle indiquée ?
  5. La teneur en peptide et la teneur en eau sont-elles données à part de la pureté ?
  6. La masse observée correspond-elle à la masse théorique de la séquence annoncée ?

Les données brutes valent mieux qu'un tableau : elles permettent de juger soi-même la forme des pics, la ligne de base et l'intégration.

Exemples de lecture sur des peptides courants

Pour le BPC-157, un pentadécapeptide, la masse théorique de référence est 1419,535 g/mol. Pour le GHK-Cu, complexe du tripeptide Gly-His-Lys avec le cuivre, elle est de 340,9 g/mol. Pour le TB-500, elle avoisine 3350,96 g/mol. Pour le Retatrutide, peptide plus long, la fiche indique une masse approximative de 4,5 à 5,0 kDa : la séquence et la masse exactes du lot sont alors définies par le COA. Dans chaque cas, la masse observée doit être cohérente avec la référence.

Ce qu'un COA ne prouve pas

Un COA décrit les propriétés analytiques d'un lot de réactif. Ce n'est pas une autorisation de mise sur le marché ni une preuve de sécurité, et il ne dit rien sur une quelconque administration à un être vivant. Pureté et sécurité sont deux notions distinctes. Les confondre est l'erreur la plus courante.

Comment classer et conserver vos COA ?

Rangez chaque COA avec le dossier du lot, en notant la date de réception et la date de reconstitution. C'est ce qui rend un résultat traçable des mois plus tard. Sans cela, un résultat d'expérience inattendu ne peut pas être attribué au produit avec certitude. Voir aussi notre guide sur la conservation des peptides lyophilisés.

Le COA chez PureChems

Chaque lot PureChems reçoit un certificat d'analyse, établi en interne et vérifié de façon indépendante. La pureté, d'au moins 99 %, est mesurée par HPLC et l'identité confirmée par spectrométrie de masse dans un laboratoire tiers. L'envoi est suivi et discret depuis l'UE.

Questions fréquentes

Que signifie COA ?

COA est l'abréviation anglaise de certificate of analysis, en français certificat d'analyse. C'est le rapport des tests réalisés sur un lot.

Que veut dire 99 % de pureté sur un COA ?

Que le pic du peptide visé représente 99 % de la surface totale des pics détectés en HPLC, à la longueur d'onde indiquée. Cela ne veut pas dire que 99 % de la masse du flacon est du peptide.

Faut-il se fier à un COA sans numéro de lot ?

Non. Sans numéro de lot, le document ne peut pas être relié au flacon que vous avez en main.

Un COA remplace-t-il une autorisation de médicament ?

Non. C'est un document analytique de lot, sans valeur réglementaire d'autorisation.

Usage de recherche uniquement. Non destiné à la consommation humaine ou animale.

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