Et analysesertifikat (COA, certificate of analysis) er en rapport for én bestemt produksjonsbatch som viser hvilke tester som er gjort, hvilke resultater de ga, og hvilken spesifikasjon resultatene ble målt mot. I et COA for peptider er de viktigste linjene renhet målt med HPLC og identitet bekreftet med massespektrometri. Et COA har bare verdi når batchnummeret på dokumentet stemmer med batchnummeret på hetteglasset.
Søker du etter COA peptider, er det som regel analysesertifikatet du lurer på: hva tallene betyr, og om du kan stole på dem. Sertifikatet er det mest informative dokumentet som følger et forskningspeptid, men også et av de mest misforståtte. Denne guiden viser hvordan du leser det, steg for steg.
Et COA er en oppsummering av analysene som er gjort på én batch av et materiale. Fordi det gjelder én bestemt batch, kan det ikke brukes om andre batcher.
Et generisk sertifikat uten batchnummer, eller et sertifikat der nummeret ikke stemmer med produktet, gir ingen sporbarhet. Da er det i praksis et markedsføringsdokument og ikke et analytisk bevis.
Et rimelig komplett sertifikat for et syntetisk peptid inneholder vanligvis:
Sammenlign batchnummeret på sertifikatet med etiketten på hetteglasset. Stemmer de ikke, gjelder sertifikatet et annet materiale. Sjekk også at analysen er datert, og at laboratoriet som utførte den, er oppgitt.
HPLC-renhet oppgis som arealprosent ved en bestemt bølgelengde, oftest 214 nm (peptidbindingen) eller 220 nm. Bølgelengden betyr noe: Urenheter som absorberer svakt ved den valgte bølgelengden, blir underrepresentert i beregningen.
Massespektrometri sammenligner observert masse med teoretisk masse. Den bekrefter at riktig molekyl er til stede, men sier ikke i seg selv hvor mye annet som finnes i prøven. Sjekk at massen stemmer med sekvensen, inkludert modifikasjoner.
Dette er den vanligste misforståelsen. Kromatografisk renhet forteller hvor stor andel av det peptidrelaterte materialet som er målpeptidet. Peptidinnhold forteller hvor stor andel av den totale tørrvekten som i det hele tatt er peptid.
Et frysetørket peptid er sjelden rent peptid målt i vekt. Pulveret inneholder også vann, salter og motioner fra rensingen, vanligvis trifluoracetat (TFA), som binder seg til basiske aminosyrer. Et peptid kan derfor ha 98 % renhet samtidig som selve peptidet utgjør en klart mindre del av vekten. Begge tallene er riktige, de svarer bare på ulike spørsmål.
Er selve kromatogrammet og massespekteret vedlagt, eller bare en tabell? Rådata lar deg vurdere toppformen, grunnlinjen og integrasjonen selv.
Vanninnhold måles med Karl Fischer-titrering eller tørketap. Frysetørket pulver trekker til seg fuktighet, så tallet påvirkes av håndtering og lagring. Misfarging eller klumper i et pulver som skal være en hvit, porøs kake, bør undersøkes før forsøket starter.
Normalt betyr det at toppen for målpeptidet utgjorde 99 % av det totale integrerte toppområdet i HPLC-kromatogrammet ved den oppgitte bølgelengden. Det er et relativt mål for peptidrelaterte stoffer som metoden fanger opp. Det betyr ikke at 99 % av massen i hetteglasset er peptid, fordi vann, salter og motioner ikke fanges opp av metoden.
Publisert karakteriseringsarbeid viser gang på gang at én metode sjelden fastslår både identitet og renhet. Grundige studier kombinerer HPLC med massespektrometri og bruker i tillegg kapillærelektroforese eller kvantitativ NMR som uavhengige kontroller. Et eksempel er en analysestudie av opioidpeptidet biphalin i Journal of Peptide Research. Der bekreftet aminosyreanalysen bare halve strukturen, og forskerne måtte bruke tandem-massespektrometri for å bekrefte hele sekvensen. Renheten ble målt med både HPLC og kapillærelektroforese, og motionet trifluoracetat ble kvantifisert for seg. Et enkelt prosenttall på et sertifikat komprimerer altså et sammensatt analytisk bilde til ett tall, og derfor er rådata og flere metoder verdt mer enn en oppsummering.
Et COA dokumenterer de analytiske egenskapene til en batch reagens. Det er ingen godkjenning fra myndighetene, ikke et bevis på sikkerhet, og det sier ingenting om egnethet for bruk på mennesker eller dyr. Renhet og sikkerhet er to ulike begreper.
Alle peptider fra PureChems leveres med analysesertifikat for hver batch. Renheten er minst 99 %, og både HPLC og massespektrometri er utført av et uavhengig tredjepartslaboratorium. Eksempler er BPC-157 10 mg, Retatrutide 10 mg og GHK-Cu 100 mg, som alle leveres som frysetørket pulver i forseglet hetteglass.
Ta vare på sertifikatet sammen med batchnummer, mottaksdato og rekonstitueringsdato. Les mer i guiden om oppbevaring av peptider og i innføringen Hva er peptider?
Certificate of analysis, på norsk analysesertifikat. Det dokumenterer testene som er gjort på én batch.
HPLC-renhet er andelen av det påviste peptidmaterialet som er målsekvensen. Peptidinnhold er andelen av den totale tørrvekten som er peptid. Tallene måles med ulike metoder.
Et sertifikat uten batchnummer kan ikke knyttes til materialet du har foran deg, og gir derfor ingen sporbarhet.
Trifluoracetat (TFA) er et motion som blir igjen fra rensingen av syntetiske peptider. Det bidrar til vekten i hetteglasset, men regnes ikke med i HPLC-renheten.
Nei. Det er et analytisk dokument for én batch og har ingen status som godkjenning fra myndighetene.
Kun til forskningsbruk. Ikke til konsum av mennesker eller dyr.
GHK-Cu er et kobberbindende tripeptid, mens minoxidil er et lite molekyl. De er knyttet til ulike signalveier i forskning på hår og hud, og derfor studeres de sammen i sammenlignende laboratoriemodeller.
Les artikkelen
GW-0742, også solgt som Fitorine, er en selektiv PPAR-delta-agonist som studeres i metabolsk forskning og forskning på genuttrykk. Kunnskapsgrunnlaget er preklinisk, og stoffet er ikke godkjent som legemiddel.
Les artikkelen
En guide til å kjøpe nootropika til forskning: hvilke racetamer, nevropeptider og peptidavledede forbindelser som finnes, hvilken form de leveres i, og hva du bør sjekke hos leverandøren.
Les artikkelen