In breve: come conservare i peptidi liofilizzati? Fiala sigillata, al freddo e al buio: in frigorifero a 2-8 °C per periodi brevi, in congelatore a -20 °C o meno per periodi lunghi, sempre seguendo le indicazioni del certificato di analisi. Dopo la ricostituzione il peptide è molto meno stabile: la soluzione va in frigorifero, divisa in aliquote monouso, con solvente, concentrazione e data annotati.
La conservazione è la variabile meno appariscente di un esperimento e una delle cause più frequenti di risultati che non si riproducono. Una fiala passata per un corriere al caldo, un congelatore con sbrinamento automatico o mesi sul bancone sotto la luce non è più identica a quella descritta nel suo certificato. Ecco le regole pratiche.
La stabilità ha due facce, che si misurano in modo separato:
Le due cose possono andare in direzioni diverse. Un campione può superare il controllo d'identità con la spettrometria di massa mentre una parte consistente del peptide si è aggregata e non è più disponibile in soluzione.
La forma liofilizzata è di gran lunga la più resistente. Togliere l'acqua è proprio ciò che dà ai peptidi secchi la loro lunga durata.
Non esiste una risposta unica: dipende dalla sequenza, dalla formulazione e dalle condizioni. Gli studi di stabilità pubblicati su formulazioni liofilizzate di peptidi e proteine riportano un'integrità conservata per 12-24 mesi a 2-8 °C, con finestre più brevi a temperatura ambiente. Il riferimento corretto resta la condizione e la data indicate nel COA del lotto, non un numero generico.
Una volta in soluzione, il peptide diventa molto meno stabile, perché l'acqua partecipa direttamente alle principali vie di degradazione e le molecole sciolte possono aggregarsi o aderire alle pareti. La soluzione va trattata come una scorta di lavoro di breve durata.
pH e conservanti cambiano da un solvente all'altro e influiscono sulla stabilità. L'acqua batteriostatica è acqua sterile con lo 0,9% di alcol benzilico come conservante: limita la crescita batterica e permette di usare la soluzione più a lungo rispetto all'acqua sterile semplice. Alcuni peptidi richiedono invece acqua semplice o un acido diluito, come indicato nella loro documentazione. Il confronto è in acqua batteriostatica o acido acetico, la procedura in come ricostituire un peptide liofilizzato.
L'acqua batteriostatica, a fiala chiusa, si conserva a temperatura ambiente tra 15 e 25 °C, al riparo da contaminazioni.
Quando arriva un ordine conviene registrare subito numero di lotto, purezza HPLC, contenuto peptidico se indicato, condizione di conservazione riportata nel certificato e stato dell'imballaggio. Come leggere queste voci è spiegato in come leggere il certificato di analisi di un peptide.
I peptidi PureChems arrivano liofilizzati in fiale sigillate con chiusura sterile, con purezza ≥99% verificata da un laboratorio terzo con HPLC e spettrometria di massa e un certificato di analisi per ogni lotto. La spedizione è tracciata e discreta dall'interno dell'UE.
I dati di stabilità servono alla riproducibilità degli esperimenti e al controllo qualità dei reagenti. Non dicono nulla sull'idoneità all'uso in persone o animali. Nell'Unione europea i peptidi da ricerca sono reagenti forniti nel quadro REACH, non medicinali autorizzati.
In frigorifero a 2-8 °C per periodi brevi, in congelatore a -20 °C o meno per periodi lunghi. Vale sempre la condizione indicata sul certificato del lotto.
Perché l'acqua partecipa a idrolisi e deammidazione e le molecole in soluzione possono aggregarsi o aderire alle pareti del contenitore.
I cicli ripetuti di congelamento e scongelamento favoriscono l'aggregazione. Per questo si preparano aliquote monouso al momento della ricostituzione.
Per evitare che l'umidità dell'aria condensi sulla polvere fredda.
A fiala chiusa, a temperatura ambiente tra 15 e 25 °C, al riparo da contaminazioni.
Solo per uso di ricerca. Non destinato al consumo umano o animale.
Il blu di metilene è un composto sintetico redox-attivo con una lunga storia come colorante e strumento di ricerca. Per comprarlo a uso di laboratorio contano il grado del materiale, la purezza dichiarata con metodo e un certificato di analisi legato al lotto.
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